目的 丙型肝炎病毒NS5B基因转染人肝痛细胞系Hep3B细胞,检测NS5B的表达与细胞内RNA聚合酶活性.方法 使用脂质体把包含伞长丙型肝炎病毒NS5B基因的重组载体pcDNA-5B转染到Hep3B细胞.RT-PCR和Wes-tern blot鉴定NS5B基因的表达,荧光素酶检测NS5B的细胞内RNA依赖的RNA聚合酶活性.结果 RT-PCR和Westernblot发现转染NS5B基因的Hep3B细胞产生NS5B mRNA和NS5B蛋白,荧光素酶分析表明Hep3B细胞表达的NS5B蛋白具有细胞内RNA依赖的RNA聚合酶活性.结论 人肝癌细胞系Hep3B细胞可以成功表达NS5B基因,且表达的NS5B蛋白具备细胞内RNA依赖的RNA聚合酶活性.
作者:孔令保;刘志文;吴晓玉;刘好桔;王园秀
来源:第三军医大学学报 2010 年 32卷 1期