根据丙型肝炎病毒(HCV)丝氨酸蛋白酶晶体结构特点,设计并构建了一种新的单链型丝氨酸蛋白酶分子.该分子由辅因子NS4A的核心序列、柔性连接子GSGS和NS3丝氨酸蛋白酶结构域组成.利用设计的3条引物,通过2轮PCR获得单链丝氨酸蛋白酶基因,插入原核表达载体pQE30中,转化大肠杆菌M15,获得重组克隆.经低剂量诱导和低温培养,目的基因获得高水平可溶表达.以金属螯合层析法纯化的重组蛋白纯度达95
作者:杜桂鑫;侯利华;陈万荣;刘树玲;张永国;孙大铭;王海涛
来源:中国生物化学与分子生物学报 2002 年 18卷 2期