目的 探索人食管癌细胞系Hedgehog信号通路相关基因的表达状况、HHIP基因启动子区甲基化状态与HHIP表达的关系.方法 采用RT-PCR方法检测5个食管癌细胞系Hedgehog信号通路SHH、PTCH1、SMO、HHIP和Gli的表达情况.用基于甲基化敏感酶和甲基化依赖酶酶切、并结合荧光定量PCR方法分析食管癌细胞系HHIP基因启动子区甲基化状态,并检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后食管癌细胞系HHIP mRNA表达的变化.结果 SHH、PTCH1、SMO和 Gli mRNA在5个食管癌细胞系中都有较高表达.HHIP在Kyse450细胞系的表达较高,约为其余4个细胞系表达量的3~5倍.与之相应,Kyse450细胞HHIP基因CpG岛为非甲基化状态,其余4个细胞系CpG岛都发生了高甲基化.采用5-Aza-CdR 去除甲基化后,HHIP基因表达较处理前增加了10~20倍.结论 Hedgehog信号通路的异常激活可能参与了食管癌的发生、发展过程,食管癌细胞系HHIP基因的表达抑制与其基因启动子区CpG岛高甲基化相关.
作者:邱宗林;许强;张婷;王永峰;陈香梅;叶彬;鲁凤民
来源:第三军医大学学报 2011 年 33卷 5期