目的 从大鼠肠系膜淋巴结、外周淋巴结中分离纯化exosome,鉴定其对T细胞增殖的影响.方法 取出BN(RTln)大鼠的外周淋巴结及肠系膜淋巴结并研磨、离心以获得非细胞组织上清,采用超滤密度梯度离心法提取exosome.透射电镜对收集的exosome进行形态学鉴定,BCA法进行蛋白定量,SDS-PAGE电泳分离蛋白,Western blot检测IL-10的表达,并通过昆合淋巴细胞培养检测其对T细胞增殖的影响.结果 两种淋巴组织来源的非细胞组织上清均含有exosome,肠系膜淋巴结源性exosome蛋白浓度[(1.92±0.10) μg/μL]显著高于外周淋巴结源性exosome[(1.57±0.06) μg/μL,P＜0.05],SDS-PAGE显示两种组织源性exosome所含蛋白种类和数量有明显差异,Western blot显示肠系膜淋巴结固有exosome中IL-10的表达显著高于外周淋巴结固有exosome,混合淋巴细胞培养结果显示肠系膜淋巴结固有exosome和外周淋巴结固有exosome对T细胞的增殖均有促进作用(P＜0.05),外周淋巴结源性exosome的促增殖作用显著大于肠系膜淋巴结源性exosome(P＜0.05).结论 肠系膜淋巴结、外周淋巴结均含有组织固有exosome,两种组织来源exosome有蛋白浓度和蛋白种类的差异,且均能促进淋巴细胞增殖,促进程度有显著差异.
作者：孙祯；黄赤兵；宋亚军；余雪松；贺伟峰；陈益荣；胡文刚；王晋
来源：第三军医大学学报 2013 年 35卷 4期
