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目的 研究小檗碱(berberine,BBR)在炎症反应时对肠上皮屏障功能的保护作用.方法 建立人肠上皮细胞株Caco-2单层培养模型,将单层细胞分为对照组、BBR组、TNF-α+ IFN-γ组、TNF-α+ IFN-γ+ BBR组.用电阻仪测定跨单层肠上皮细胞电阻(TER),测定时相点为处理后0、6、12、24、36 h和48 h;免疫荧光法和蛋白质印迹法检测紧密连接蛋白Occludin的分布及表达变化;蛋白质印迹法检测肌球蛋白轻链(MLC)和磷酸化肌球蛋白轻链(pMLC)的蛋白表达.结果 对照组与BBR组TER均无明显变化;TNF-α+ IFN-γ组TER逐渐下降,并于12、24、36 h及48 h显著低于0 h(P<0.05);TNF-α+ IFN-γ+ BBR组也呈逐渐下降趋势,但降幅小于TNF-α+ IFN-γ组,并于12、24、36h及48h显著高于TNF-α+IFN-γ组(P<0.05).各组紧密连接蛋白Occludin表达无明显变化(P>0.05);但TNF-α+ IFN-γ组Occludin形态有明显变化,并发生重分布,而TNF-α+ IFN-γ+ BBR组Occludin形态变化则较TNF-α+ IFN-γ组明显减轻.TNF-α+ IFN-γ组pMLC表达显著高于对照组或BBR组(P<0.05),而TNF-α+IFN-γ+ BBR组pMLC表达则明显低于TNF-α+ IFN-γ组(P<0.05).结论 小檗碱通过降低MLC磷酸化水平,改善紧密连接蛋白定位分布变化,从而减轻炎症反应时肠上皮屏障功能损害.

作者:曹敏;黄家君

来源:第三军医大学学报 2013 年 35卷 5期

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作者:
曹敏;黄家君
来源:
第三军医大学学报 2013 年 35卷 5期
标签:
小檗碱 干扰素γ 肿瘤坏死因子-α 肠上皮 肌球蛋白轻链 屏障功能
目的 研究小檗碱(berberine,BBR)在炎症反应时对肠上皮屏障功能的保护作用.方法 建立人肠上皮细胞株Caco-2单层培养模型,将单层细胞分为对照组、BBR组、TNF-α+ IFN-γ组、TNF-α+ IFN-γ+ BBR组.用电阻仪测定跨单层肠上皮细胞电阻(TER),测定时相点为处理后0、6、12、24、36 h和48 h;免疫荧光法和蛋白质印迹法检测紧密连接蛋白Occludin的分布及表达变化;蛋白质印迹法检测肌球蛋白轻链(MLC)和磷酸化肌球蛋白轻链(pMLC)的蛋白表达.结果 对照组与BBR组TER均无明显变化;TNF-α+ IFN-γ组TER逐渐下降,并于12、24、36 h及48 h显著低于0 h(P<0.05);TNF-α+ IFN-γ+ BBR组也呈逐渐下降趋势,但降幅小于TNF-α+ IFN-γ组,并于12、24、36h及48h显著高于TNF-α+IFN-γ组(P<0.05).各组紧密连接蛋白Occludin表达无明显变化(P>0.05);但TNF-α+ IFN-γ组Occludin形态有明显变化,并发生重分布,而TNF-α+ IFN-γ+ BBR组Occludin形态变化则较TNF-α+ IFN-γ组明显减轻.TNF-α+ IFN-γ组pMLC表达显著高于对照组或BBR组(P<0.05),而TNF-α+IFN-γ+ BBR组pMLC表达则明显低于TNF-α+ IFN-γ组(P<0.05).结论 小檗碱通过降低MLC磷酸化水平,改善紧密连接蛋白定位分布变化,从而减轻炎症反应时肠上皮屏障功能损害.