目的 分离、鉴定CD133+人肝癌干细胞以及131I-CD133mAb对其生物学效应的影响.方法 为选择最适的细胞系,流式细胞仪检测Huh-7和HepG2细胞中CD133表达率;磁珠分选Huh-7细胞,流式细胞仪检测分选后CD133表达率;体外成球、克隆形成实验及体内成瘤实验验证干细胞特性;氯胺T法制备131 I标记CD133单克隆抗体(131 I-CD133mAb)并鉴定;取分选后的CD133+-Huh-7细胞、Huh-7细胞和HepG2细胞进行实验,将每种细胞分成4组(131I-CD133mAb组、131I组、CD133mAb组、131I+ CD133mAb组);MTT法检测各组对CD133+-Huh-7细胞生长抑制的最适剂量和各组在最适剂量作用后24、48、72 h对3组细胞生长抑制率;流式细胞仪检测131I-CD133mAb作用3组细胞72 h时细胞凋亡和细胞周期的变化.结果 Huh-7和HepG2细胞系CD133表达率分别为18.8%和5.2%,故选用Huh-7细胞进行分选;磁珠分选后CD133+-Huh-7细胞CD133的表达率为99.28%,与分选前比较差异有统计学意义(P<0.01).CD133+-Huh-7细胞相对于CD133--Huh-7细胞具有更强的体外成球能力、克隆形成能力和体内成瘤能力.131 I-CD133mAb标记率为87.92%,放射化学纯度为97.54%,具有较好的稳定性和免疫活性.当131 I 4.8 MBq/100 μL、CD133mAb 4.8 μg/100 μL时对CD133+-Huh-7细胞抑制率最高(P<0.05),取
作者:侯妍利;唐敏;陈兴月;段丽群;康强强;舒锦;李少林
来源:第三军医大学学报 2014 年 36卷 3期