目的 利用噬菌体随机肽库筛选人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,hALR)特异结合肽并研究其抗肝癌作用.方法 以hALR为靶分子,利用Ph.D.TM噬菌体肽展示系统筛选出与hALR特异性结合的单克隆噬菌体,ELISA法鉴定筛选出的单克隆噬菌体与hALR的结合性,对特异性结合噬菌体DNA中插入片段进行PCR扩增、测序及短肽合成,MTS法检测特异结合肽对人HepG2肝癌细胞增殖的影响,观察特异结合肽对裸鼠人HepG2肝癌移植瘤生长的影响.结果 经过3轮生物淘筛,特异性结合噬菌体得到富集;筛选到的单克隆噬菌体与hALR结合具有特异性(与对照组比较P＜0.05);特异结合肽在体外能抑制人HepG2肝癌细胞增殖(24 h抑制率为46.2％ vs 6.5％,P＜0.01;48 h抑制率为23.6％ vs 5.9％,P＜0.05),在体内能抑制裸鼠人HepG2肝癌移植瘤生长[(1.250±0.512) cm3 vs (4.590±0.398) cm3,P＜0.01;(1.100±0.453)gvs (3.794 ±0.299)g,P＜0.01];该特异结合肽免疫小鼠后机体内无相应抗体检出,且对裸鼠的重要脏器组织结构及功能无明显损害.结论 利用噬菌体肽库筛选到hALR特异结合肽,该短肽通过阻断hALR促肝癌细胞增殖作用,能抑制人HepG2肝癌细胞在体内外增殖,达到抗肝癌的作用,同时产生较低的免疫原性及毒性损害.
作者：冯倩；刘燕倩；孙航；刘杞
来源：第三军医大学学报 2014 年 36卷 6期
