目的 探讨β-catenin基因对脊髓源性神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化的作用.方法 分离E14胎鼠脊髓组织,单细胞克隆技术对其分离细胞扩增培养,免疫荧光对细胞进行鉴定.实验分为3组:单独培养的NSCs(空白组)、感染空载AdGFP腺病毒的NSCs(GFP组)、感染Adβ-catenin腺病毒的NSCs(β-catenin组).荧光显微镜观察细胞感染效率,RT-PCR检测神经元特异烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP) mRNA表达,免疫荧光检测神经元核蛋白(NeuN)、GFAP的表达及定位,Western blot检测NeuN、GFAP的表达.结果 胎鼠脊髓组织分离的细胞具有连续分化及克隆能力,形成少量细胞团,机械分离后细胞呈不规则球形;早期分离的大部分细胞Nestin抗原呈阳性;NSEmRNA在β-catenin组显著高于空白组及GFP组,GFAP mRNA表达均低于其他两组(P＜0.05);免疫荧光显示β-catenin组NeuN的表达水平显著高于空白组及GFP组(P＜0.05),主要定位于细胞核中,GFAP的表达相对较低(P＜ 0.05);Western blot检测显示β-catenin组的NeuN表达显著高于空白组及GFP组,而GFAP的表达低于其他两组(P＜0.05).结论 β-catenin可促进脊髓源性NSCs向神经元分化.
作者：李程；毕杨；汪九龄；南国新
来源：第三军医大学学报 2016 年 38卷 5期
