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目的 探讨Tmub1对再生肝细胞有丝分裂的影响及与securin的相互作用机制.方法 使用40只雌性SD大鼠建立肝大部分切除术后肝再生模型,于术后0、6、12、24、48、72、96、168 h分别取再生肝组织,RT-qPCR和Western blot检测Tmub1和securin在肝再生过程中的mRNA与蛋白表达变化趋势.在大鼠正常肝细胞系BRL-3A中分别建立慢病毒稳定过表达Tmub1、干扰Tmub1和阴性对照组细胞株,用诺考达唑处理获取同步于有丝分裂期的细胞,免疫荧光观察Tmub1过表达组和阴性对照组细胞有丝分裂情况,并用免疫沉淀和Western blot检测Tmub1过表达、Tmub1干扰和阴性对照组BRL-3A细胞中securin的泛素化水平.结果 Tmub1的mRNA和蛋白水平在肝切除术后24、48 h最高,securin的mRNA水平也在48 h最高,而蛋白水平在48 h最低.Tmub1过表达可影响大鼠肝细胞有丝分裂,且securin泛素化水平显著低于阴性对照组(P<0.01);Tmub1干扰组securin泛素化水平显著高于阴性对照组(P<0.01).结论 Tmub1可通过抑制securin的泛素化影响大鼠再生肝细胞的有丝分裂.

作者:付航玮;陈健;许建华;李光耀;陈平

来源:第三军医大学学报 2017 年 39卷 7期

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作者:
付航玮;陈健;许建华;李光耀;陈平
来源:
第三军医大学学报 2017 年 39卷 7期
标签:
肝再生 细胞增殖 细胞周期 泛素化 liver regeneration cell proliferation cell cycle ubiquitylation
目的 探讨Tmub1对再生肝细胞有丝分裂的影响及与securin的相互作用机制.方法 使用40只雌性SD大鼠建立肝大部分切除术后肝再生模型,于术后0、6、12、24、48、72、96、168 h分别取再生肝组织,RT-qPCR和Western blot检测Tmub1和securin在肝再生过程中的mRNA与蛋白表达变化趋势.在大鼠正常肝细胞系BRL-3A中分别建立慢病毒稳定过表达Tmub1、干扰Tmub1和阴性对照组细胞株,用诺考达唑处理获取同步于有丝分裂期的细胞,免疫荧光观察Tmub1过表达组和阴性对照组细胞有丝分裂情况,并用免疫沉淀和Western blot检测Tmub1过表达、Tmub1干扰和阴性对照组BRL-3A细胞中securin的泛素化水平.结果 Tmub1的mRNA和蛋白水平在肝切除术后24、48 h最高,securin的mRNA水平也在48 h最高,而蛋白水平在48 h最低.Tmub1过表达可影响大鼠肝细胞有丝分裂,且securin泛素化水平显著低于阴性对照组(P<0.01);Tmub1干扰组securin泛素化水平显著高于阴性对照组(P<0.01).结论 Tmub1可通过抑制securin的泛素化影响大鼠再生肝细胞的有丝分裂.