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目的 通过检测腺病毒介导的野生型第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)对体外活化肝星状细胞(HSC)细胞周期的影响,探讨过表达的野生型PTEN抑制活化HSC增殖的可能机制. 方法 体外培养肝星状细胞系HSC-T6,以腺病毒为载体将野生型PTEN基因瞬时转染活化HSC,实验分为空白对照组、Ad-GFP组和Ad-PTEN组.流式细胞术测定HSC细胞周期时相,Western blot及实时定量PCR检测HSC的PTEN表达量,Western blot检测HSC的细胞周期素D1 (cyclin D1)和细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)表达水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间比较采用Tukey检验. 结果 携带野生型PTEN基因的腺病毒(AD-PTEN)成功转染HSC,Ad-PTEN组G0/G1期HSC细胞数(67.68%±2.75%)较对照组(53.01%±2.37%)及Ad-GFP组(53.85%±3.0%)明显增高(F=38.59,P<0.01);S期HSC细胞数(14.42%±1.81%)较对照组(22.17%±1.99%)及Ad-GFP组(21.54%±1.74%)明显降低(F=18.85,P< 0.01);G2/M期HSC细胞数(17.90%±2.70%)较对照组(24.82%±3.81%)及Ad-GFP组(24.62%±3.15%)明显降低(F=7.17,P<0.01).腺病毒感染HSC后72h,Ad-PTEN组cyclin D1的相对表达量(1.12±0.07)较对照组(1.45±0.05)及Ad-GFP组(1.47±0.08)明显降低(F=42.86,P<0.01),CDK4相对表

作者:郝礼森;张晓岚;王静;李立文;莫艳波;张超;姚冬梅;姜慧卿

来源:中华肝脏病杂志 2012 年 20卷 7期

知识库介绍

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作者:
郝礼森;张晓岚;王静;李立文;莫艳波;张超;姚冬梅;姜慧卿
来源:
中华肝脏病杂志 2012 年 20卷 7期
标签:
肝硬化 细胞增殖 细胞周期 肝星状细胞 PTEN Liver cirrhosis Cell proliferation Cell cycle Hepatic stellate cell PTEN
目的 通过检测腺病毒介导的野生型第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)对体外活化肝星状细胞(HSC)细胞周期的影响,探讨过表达的野生型PTEN抑制活化HSC增殖的可能机制. 方法 体外培养肝星状细胞系HSC-T6,以腺病毒为载体将野生型PTEN基因瞬时转染活化HSC,实验分为空白对照组、Ad-GFP组和Ad-PTEN组.流式细胞术测定HSC细胞周期时相,Western blot及实时定量PCR检测HSC的PTEN表达量,Western blot检测HSC的细胞周期素D1 (cyclin D1)和细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)表达水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间比较采用Tukey检验. 结果 携带野生型PTEN基因的腺病毒(AD-PTEN)成功转染HSC,Ad-PTEN组G0/G1期HSC细胞数(67.68%±2.75%)较对照组(53.01%±2.37%)及Ad-GFP组(53.85%±3.0%)明显增高(F=38.59,P<0.01);S期HSC细胞数(14.42%±1.81%)较对照组(22.17%±1.99%)及Ad-GFP组(21.54%±1.74%)明显降低(F=18.85,P< 0.01);G2/M期HSC细胞数(17.90%±2.70%)较对照组(24.82%±3.81%)及Ad-GFP组(24.62%±3.15%)明显降低(F=7.17,P<0.01).腺病毒感染HSC后72h,Ad-PTEN组cyclin D1的相对表达量(1.12±0.07)较对照组(1.45±0.05)及Ad-GFP组(1.47±0.08)明显降低(F=42.86,P<0.01),CDK4相对表