目的 探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,IncRNA) Rpph1对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾小球系膜细胞炎症因子的影响.方法 采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测Rpph1细胞定位,实时定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测Rpph1在DN小鼠肾脏组织和系膜细胞中的水平;生物信息学技术预测Rpph1的编码蛋白能力.构建Rpph1的过表达质粒,并设计合成Rpph1的siRNAs,用qRT-PCR验证其转染效率.在高糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1-siRNA;在低糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1过表达质粒,通过Western blot检测转染Rpph1的siRNA和过表达Rpph1后肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)以及单核细胞趋化蛋白-1(macrophage cationic peptide 1,MCP-1)的表达情况.结果 与正常小鼠比较,Rpph1在DN小鼠肾脏组织中显著上调(P<0.01);同样,高糖培养的系膜细胞中Rpph1表达较低糖培养的系膜细胞显著上调(P<0.01),其主要定位于系膜细胞的细胞质.此外,生物信息学证实Rpph1不具有编码蛋白的能力.且过表达Rpph1后炎症相关因子TNF-α和MCP-1的水平明显上调(P<0.05);在下调Rpph1后,炎症相关因子TNF-α和MCP-1的表达也随之下降(P<0.05).结论 在DN小鼠肾脏组织和高糖
作者:张攀扬;孙艳;彭睿;彭惠民;张政
来源:第三军医大学学报 2019 年 41卷 1期