目的 观察锌指蛋白A20在内毒素(lipopolysaccharide,LPS)刺激情况下,对人椎间盘髓核细胞炎症因子、核因子-kappB (NF-KB)以及细胞退变指标表达变化的影响.方法 获取2017年6月至2018年7月本院骨科腰椎间盘退变患者术中切除的椎间盘组织,提取原代髓核细胞并进行培养,选择P1、P2代髓核细胞进行实验.采用完全随机法将同来源同代培养的髓核细胞分为对照组、单纯过表达A20基因腺病毒感染组、单纯LPS(10 μg/mL)刺激组及LPS(10 μg/mL)刺激+过表达A20基因腺病毒感染组.采用Real-time PCR测定A20 mRNA表达水平,Western blot检测A20蛋白、TNF-α、IL-13、NF-κB结合蛋白p65、p-p65以及退变相关指标蛋白聚糖(aggrecan)、Ⅱ型胶原(collagenⅡ)等的表达;双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测上清液TNF-o、IL-1 β的表达.结果 与对照组相比,单纯过表达A20基因组A20 mRNA与蛋白表达增高(P＜0.05),而TNF-α、IL-13、p-p65、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达无明显变化;与对照组相比,单纯LPS刺激组IL-1β、TNF-α、p-p65蛋白表达明显升高(P＜0.05),而蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达则明显降低(P＜0.05);而与单纯LPS刺激组相比,LPS刺激+过表达A20基因组TNF-α、IL-1 β和p-p65蛋白表达显著下降(P＜0.05),同时蛋白聚糖与Ⅱ型

作者：蓝海洋；杨智杰；夏辉强；陈杰；刘渤

来源：第三军医大学学报 2019 年 41卷 6期