目的 探究人退变髓核细胞中锌指蛋白A20对衰老及凋亡的影响.方法 提取并培养人退变髓核细胞,小干扰RNA(siRNA)降低A20表达,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作为炎症诱导因素,设置对照组、LPS 组、siRNA-A20 组、siRNA-A20+LPS 组.通过 Western blot 检测 A20、P21、P16、BAX、BID、BCL2、P65、p-P65蛋白表达量.细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测β-半乳糖苷酶.应用AnnexinV-PI双标法及TUNEL染色检测细胞凋亡,观察锌指蛋白A20对髓核细胞衰老及凋亡的影响.应用咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)进行挽救实验,检测A20、P21、P16、BAX、BID、BCL2、P65、P-P65蛋白表达量,探索下调锌指蛋白A20诱导细胞衰老及凋亡可能通路.结果 与对照组相比,LPS组P21、P16蛋白表达量无明显变化,siRNA-A20组及siRNA-A20+LPS组P21、P16蛋白表达明显增加(P＜0.05),β-半乳糖苷酶染色实验显示着色阳性细胞数显著增多(P＜0.05).Annexin V-PI双标法凋亡结果显示,单纯LPS刺激及单纯siRNA-A20处理组中细胞凋亡占比高于对照组(P＜0.05),但低于siRNA-A20+LPS组(P＜0.05),TUNEL染色结果与Annexin V-PI双标法结果一致(P＜0.05).凋亡相关蛋白BAX、BID在siRNA-A20+LPS中显著增加(P＜0.05),BCL2则明显降低(P＜0.05),P-P65蛋

作者：唐盼；刘渤

来源：陆军军医大学学报 2022 年 44卷 16期