目的探讨产生重组逆转录病毒包装细胞系建立及其病毒滴度(以cfu表示)的影响因素. 方法用逆转录病毒载体pSLXCMV,以磷酸钙共沉淀法转染PA317包装细胞,挑选抗性集落(PA317/pSLXCMV)扩大培养后,进行PA317/pSLXCMV细胞接种密度、培养温度(37℃,32℃)、纯化方法等对其培养上清中重组病毒cfu影响的比较性研究. 结果包装细胞的密度是影响cfu滴度的关键因素;降低培养温度需延长培养时间方可提高cfu滴度;对比离心纯化与过滤纯化,并未发现两者之间的差异. 结论该实验结果为应用逆转录病毒载体进行的ex vivo基因治疗实验研究提供重要参考指标.
作者:张惠中;范清宇;杨安钢
来源:第四军医大学学报 2001 年 22卷 4期