目的: 在本室前期工作的基础上构建汉滩病毒M基因G2片段与S基因0.7 kb片段嵌合基因的重组腺病毒. 方法: 构建含有汉滩病毒G2S0.7嵌合基因的转移载体pShuttle-G2S0.7,然后通过特异性的酶切将嵌合基因与腺病毒DNA相连,电转化E.coli JM109并用PCR方法进行筛选和鉴定,获得重组腺病毒Adeno-G2S0.7 DNA,转染HEK293细胞得到重组腺病毒. 进一步对重组腺病毒滴度和表达产物进行鉴定. 结果: 构建了含G2S0.7嵌合基因重组腺病毒,滴度可达1013～1015 pfu/L;该重组腺病毒感染HEK293细胞后,表达出可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G2的特异性单抗(mAb)所识别的融合蛋白. 结论: 利用腺病毒表达系统,成功地表达同时具有核蛋白及糖蛋白G2生物学活性的融合蛋白G2S0.7,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础.
作者：张芳琳；刘勇；于澜；胡刚；吴兴安；史梦远；白文涛；王海涛；徐志凯
来源：第四军医大学学报 2004 年 25卷 12期
