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目的改进AdEasy系统,使之更简便、高效、快捷.方法pAdtrack经酶切线性化后,转化经氯化钙处理的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒.最后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒.荧光显微镜下细胞中重组腺病毒观察绿色荧光蛋白的表达.结果应用氯化钙法由pAdtrack转化AdEasier-1细菌,可获得极高比例的(20/20)阳性重组腺病毒克隆.结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短、对实验室的条件要求低.

作者:汤福祥;郑权;黄宗海;张庆国;车小燕

来源:第一军医大学学报 2003 年 23卷 5期

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作者:
汤福祥;郑权;黄宗海;张庆国;车小燕
来源:
第一军医大学学报 2003 年 23卷 5期
标签:
AdEasy系统 腺病毒 细菌内同源重组
目的改进AdEasy系统,使之更简便、高效、快捷.方法pAdtrack经酶切线性化后,转化经氯化钙处理的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒.最后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒.荧光显微镜下细胞中重组腺病毒观察绿色荧光蛋白的表达.结果应用氯化钙法由pAdtrack转化AdEasier-1细菌,可获得极高比例的(20/20)阳性重组腺病毒克隆.结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短、对实验室的条件要求低.