目的 观察细胞穿透肽PEP-1介导CAT转导入在体大鼠心肌组织的能力.探究PEP-1-CAT融合蛋白对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 以生理盐水为对照,分别从SD大鼠尾静脉注射500μg PEP-1-CAT和CAT融合蛋白,在0.5,1,2,4,8,24 h时将其处死,取其心脏.免疫荧光检测CAT的转导能力,用试剂盒检测心肌CAT的酶活性.40只SPF级雄性SD大鼠,随机分为5组,假手术组,心肌缺血再灌注组,100μg PEP-1-CAT融合蛋白预处理组,300μg EP-1-CAT融合蛋白预处理组,500μg PEP-1-CAT融合蛋白预处理组.结扎冠状动脉前降支1h,再灌注2 h末,检测血中的LDH和CK活性以及心肌组织内的MDA含量.结果 生理盐水组以及CAT组,荧光显微镜下均未见到绿色荧光;PEP-1-CAT各组均可观察剑绿色荧光,且8 h时强度最大;酶活性检测显示,CAT组与生理盐水对照组差别没有统计学意义(P>0.05),而PEP-1-CAT组随着时间的延长,心肌组织中CAT的活性逐渐增加,在8 h时达到峰值,为对照组的4.20倍.PEP-1-CAT各剂量组均能显著减少血清中LDH和CK活性和心肌组织的MDA含量(P<0.01).结论 PEP-1能够介导CAT以时间依赖的方式转导人在体大鼠心肌组织,转导入大鼠心肌组织内的CAT具有相应的酶活性:PEP-1-CAT融合蛋白预处理对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,为临床应用
作者:张永军;王家宁;唐俊明;黄永章;杨建业;郭凌郧
来源:南方医科大学学报 2009 年 29卷 12期