目的：探讨慢病毒介导shRNA靶向下调缝隙连接蛋白26（Cx26）表达对人高侵袭性肝癌细胞上皮间质转化（EMT）及侵袭的影响。方法用慢病毒介导Cx26-shRNA感染SK-Hep-1细胞并用嘌呤霉素筛选稳转细胞。荧光定量PCR和Western blot检测干扰效率。光镜观察细胞形态改变。Western blot检测EMT上皮标志物E-cadherin、间质标志物vimentin的蛋白表达水平。Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力变化。结果成功建立稳定下调Cx26表达的SK-Hep-1细胞（shRNA-Cx26组），与感染EGFP空载体（shRNA-control组）及未感染的SK-Hep-1细胞（blank-control组）比较，其Cx26 mRNA和蛋白表达均明显降低（P<0.01），间质细胞形态转变为上皮细胞形态，E-cadherin蛋白表达明显增多、vimentin蛋白表达明显减少（P<0.01），体外侵袭能力也显著降低（P<0.01）。结论靶向下调Cx26表达能抑制人高侵袭性肝癌SK-Hep-1细胞的EMT和体外侵袭。
作者：阳洁；覃贵慧；陈军泽
来源：南方医科大学学报 2014 年 12期
