目的 应用siRNA技术沉默S100A4基因表达对膀胱癌干细胞增殖及成瘤能力的影响.方法 筛选鉴定出MB49膀胱癌干细胞后,应用核素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术,发现MB49膀胱癌细胞与膀胱癌干细胞表达差异的蛋白质S100A4蛋白.设计并合成S100A4基因特异性的siRNA序列,转染膀胱癌干细胞,应用Western blot和qPCR检测在siRNA对S100A4的影响,体内、外实验观察siRNA抑制S100A4后对膀胱癌干细胞增殖及成瘤能力的影响.结果 通过iTRAQ核素标记结合液相色谱和串联质谱分析,共鉴定出差异蛋白共65个,S100A4在基因表达水平差异最显著(差异为5.70,P<0.05).与空白对照组、阴性对照组相比,S100A4 siRNA转染组的S100A4基因和蛋白表达降低(P<0.05).CCK8实验和裸鼠成瘤实验发现,与空白对照组与阴性对照组相比较,siRNA干扰S100A4表达后,膀胱癌干细胞生长明显受到抑制,成瘤能力受到抑制(P<0.05).结论 膀胱癌干细胞中S100A4表达与膀胱癌的复发、转移有关,S100A4蛋白可能成为消灭膀胱癌干细胞,治疗膀胱癌的分子靶标.
作者：王春燕；聂庆文；周璇；黄大雄；肖炜强；朱永通
来源：南方医科大学学报 2017 年 37卷 7期
