目的建立哺乳动物嗅感觉神经细胞体外培养的方法.方法取成年家兔的嗅区粘膜,用胰酶和胶原酶消化法进行嗅感觉神经细胞的分离与原代培养,并应用抗神经微丝蛋白(NFP)抗体、抗嗅觉标记蛋白(0MP)抗体进行免疫细胞化学染色,同时采用甲苯胺蓝神经特异性染色和扫描电镜对其进行鉴定.结果从嗅粘膜分离以及原代培养得到的嗅感觉神经元,光镜、电镜下为典型的双极神经元,OMP、NFP阳性,神经元特异性染色阳性.分离的嗅感觉神经元可在体外存活数小时,其细胞形态、生存数量和存活时间均能满足体外实验的基本要求.结论本实验在家兔建立了较稳定、可靠的嗅感觉神经细胞分离和原代培养方法.为深入开展嗅感觉神经细胞的离体研究,提供了较为理想的材料来源和技术保障.
作者：魏永祥；韩德民；蔡贞；杨凌；刘小超；羡慕；张晓斌
来源：耳鼻咽喉-头颈外科 2003 年 10卷 4期
