目的:建立组织块法体外培养嗅觉受体神经元(ORNs)细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的实时观察系统,分析嗅觉信号转导体系中几个关键环节的作用.方法:以双激发波长钙离子荧光探针Fura-2 AM孵育培养的ORNs,通过双波长比率法,实时定量观察ORNs的[Ca2+]i.分别以Forskolin和IBMX刺激ORNs,观察[Ca2+]i的改变.分别耗竭细胞内钙库和使用不含钙离子的细胞外液,判断细胞内[Ca2+]i的来源.结果:静息ORNs的[Ca2+]i为(58.5±12.8) nmol/L.Forskolin和IBMX刺激可使ORNs的[Ca2+]i快速升高,且作用可逆.二者所引发的钙信号来自于细胞外钙内流,而非细胞内钙库的释放.结论:本研究成功建立了实时定量观察ORNs细胞内[Ca2+]i的系统,ORNs的[Ca2+]i受第二信使门控钙离子通道的调节.
作者:羡慕;韩德民;张罗
来源:临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2010 年 24卷 20期