目的 探讨Wnt/β-catenin信号通路对斑马鱼侧线毛细胞再生影响.方法 利用模式动物斑马鱼侧线毛细胞可再生的优势,通过流式细胞分选助细胞类群、荧光定量PCR、整胚原位杂交以及外源添加Wnt/β-catenin信号通路小分子化合物抑制剂和增强剂的方法,观察顺铂诱导毛细胞损伤过程中Wnt/β-catenin信号通路各因子的时空表达情况及毛细胞再生情况变化,为探究经典信号因子Wnt/β-catenin信号通路对毛细胞再生的影响提供在体实验依据.结果 反转录PCR(reverse transcription PCR,RTPCR)与定量PCR(quantitative PCR,Q-PCR)结果显示,与对照组相比,顺铂处理组Wnt/β-catenin信号通路配体wnt2,wnt3a和关键因子ctnnb1(beta-catenin)在助细胞类群中表达量升高(P＜0.05).整胚原位杂交结果表明Wnt/β-catenin信号通路拮抗因子dkk1a和dkk2在助细胞类群表达量下降.外源添加抑制剂,低浓度连续浸泡48小时再生毛细胞数目可达到正常组40％左右,高浓度连续浸泡48小时毛细胞再生数目仅为正常组10％左右.而在毛细胞再生前12小时时间窗添加抑制剂也可观察到毛细胞再生数目减少(P＜0.0001).外源添加增强剂,毛细胞再生数目相较对照组无显著变化(P＞0.05).结论 通过分选助细胞各因子表达变化、整胚原位杂交显示时空图谱以及外源添加抑制剂
作者：芈肖肖；严健；李圆；施军平
来源：中国耳鼻咽喉头颈外科 2018 年 25卷 7期
