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目的:从噬菌体随机多肽文库中筛选肺癌相关抗原WLAAg1表位,深入了解抗原特性,为探索肺癌临床诊断、治疗新方法打下基础。方法:采用肺癌单克隆抗体WLA2C4对噬菌体完全随机十五肽表达文库进行多级亲和筛选,建立与WLA2C4具亲和力的肽库;随机挑选12个克隆,鉴定抗体特异性;测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析。结果:12个克隆均为阳性克隆,DNA序列相同,为5′-GCT GGT TGG ATT ACT TTT CAT CGT CGT CAT CAT GAT CGT GTT CTT-3′,其氨基酸序列为AGWITPHRRHHDRVL。氨基酸分析,其中有3个胰蛋白酶酶切位点,与WLA-Ag1抗原能被胰蛋白酶消化的特性相一致。结论:应用肺癌单抗WLA-2C4从噬菌体文库筛选出的十五肽序列可能是肺癌相关抗原WLAAg1的模拟表位。此方法对肿瘤相关抗原表位的筛选具有可行性。

作者:李新元;黄英武;郑燕华;韩瑞刚

来源:癌症 2001 年 20卷 1期

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作者:
李新元;黄英武;郑燕华;韩瑞刚
来源:
癌症 2001 年 20卷 1期
标签:
噬菌体 随机多肽文库 肺肿瘤 抗原 表位
目的:从噬菌体随机多肽文库中筛选肺癌相关抗原WLAAg1表位,深入了解抗原特性,为探索肺癌临床诊断、治疗新方法打下基础。方法:采用肺癌单克隆抗体WLA2C4对噬菌体完全随机十五肽表达文库进行多级亲和筛选,建立与WLA2C4具亲和力的肽库;随机挑选12个克隆,鉴定抗体特异性;测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析。结果:12个克隆均为阳性克隆,DNA序列相同,为5′-GCT GGT TGG ATT ACT TTT CAT CGT CGT CAT CAT GAT CGT GTT CTT-3′,其氨基酸序列为AGWITPHRRHHDRVL。氨基酸分析,其中有3个胰蛋白酶酶切位点,与WLA-Ag1抗原能被胰蛋白酶消化的特性相一致。结论:应用肺癌单抗WLA-2C4从噬菌体文库筛选出的十五肽序列可能是肺癌相关抗原WLAAg1的模拟表位。此方法对肿瘤相关抗原表位的筛选具有可行性。