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背景与目的: EB病毒与鼻咽癌 (nasopharyngeal carcinoma, NPC)密切相关.可应用多种血清学方法检测鼻咽癌患者血清 EBV抗体,本研究利用鼻咽癌患者血清中纯化的 EB病毒相关多抗,从噬菌体展示的随机肽库中筛选相关的优势抗原表位,在表位水平为鼻咽癌患者血清抗体的检测寻找新的检测抗原.方法:以 B95 8细胞 EBV蛋白为抗原,从鼻咽癌患者血清中洗脱 EB病毒相关多抗,对噬菌体展示的随机 12肽库进行三轮生物淘洗.用夹心 ELISA法和竞争抑制实验筛选阳性克隆,对这些阳性克隆进行测序,并将其展示的外源多肽与 EB病毒蛋白的抗原性区域进行同源序列比对分析.结果:从第三轮的淘洗洗脱液中随机挑取 64个噬菌体克隆,用夹心 ELISA法筛选到 25个阳性克隆,阳性率为 39.06

作者:张颖;肖锡宾;张昌卿;李经略;孙韻;叶永照;冯凯涛

来源:癌症 2004 年 23卷 9期

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作者:
张颖;肖锡宾;张昌卿;李经略;孙韻;叶永照;冯凯涛
来源:
癌症 2004 年 23卷 9期
标签:
鼻咽肿瘤 抗原表位 随机多肽文库 多克隆抗体
背景与目的: EB病毒与鼻咽癌 (nasopharyngeal carcinoma, NPC)密切相关.可应用多种血清学方法检测鼻咽癌患者血清 EBV抗体,本研究利用鼻咽癌患者血清中纯化的 EB病毒相关多抗,从噬菌体展示的随机肽库中筛选相关的优势抗原表位,在表位水平为鼻咽癌患者血清抗体的检测寻找新的检测抗原.方法:以 B95 8细胞 EBV蛋白为抗原,从鼻咽癌患者血清中洗脱 EB病毒相关多抗,对噬菌体展示的随机 12肽库进行三轮生物淘洗.用夹心 ELISA法和竞争抑制实验筛选阳性克隆,对这些阳性克隆进行测序,并将其展示的外源多肽与 EB病毒蛋白的抗原性区域进行同源序列比对分析.结果:从第三轮的淘洗洗脱液中随机挑取 64个噬菌体克隆,用夹心 ELISA法筛选到 25个阳性克隆,阳性率为 39.06