目的：克隆和筛选肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因。方法：将肺腺癌多药耐药细胞（SPC-A-1/CDDP）作为实验方，肺腺癌细胞（SPC-A-1）作为对照方，应用抑制消减杂交技术，构建实验方特异表达cDNA消减文库；用斑点杂交法初步筛选cDNA消减文库后，将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析（Genbank），对新的cDNA序列进行Northern blot杂交验证。结果：建立了一个肺腺癌多药耐药细胞（SPC-A-1/CDDP）特异表达cDNA消减文库，斑点杂交法初步筛选显示23个克隆中有SPC-A-1/CDDP特异表达cDNA片断，测序和同源性分析表明2个cDNA片断为新序列，其余cDNA片断与已知基因有93％～100％的同源性，Northern blot杂交结果表明2个新的cDNA片断来自SPC-A-1/CDDP细胞。结论：2个新的cDNA序列可能为未知肺腺癌多药耐药相关基因序列；抑制消减杂交法是克隆特异表达基因的有效方法。
作者：陈杰；钱桂生；黄桂君；熊玮；李靖
来源：癌症 2001 年 20卷 4期
