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背景与目的:泛素-蛋白酶体途径是真核细胞中选择性降解短寿命蛋白的重要途径.S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)是此途径中的一个重要组件,它是决定细胞周期素依赖性激酶抑制因子p27降解的关键蛋白.近年来,在实体瘤的研究中发现Skp2是癌蛋白,能促进癌细胞的细胞周期进展,但在白血病细胞恶性增殖中所起的作用还未见报道.本实验旨在研究Skp2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)对白血病细胞系K562细胞生长和增殖的影响及其可能的机制.方法:Skp2反义寡核苷酸和K562细胞共同培养,通过显微镜下观察、四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验观察K562细胞生长和增殖,流式细胞术分析细胞周期,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chainreaction,RT-PCR)和细胞免疫化学测定Skp2 mRNA、蛋白及p27 mRNA、蛋白的表达.结果:Skp2反义寡核苷酸处理后,K562细胞增殖受抑,细胞周期阻滞于Go/G1期[Skp2 ASODN组(39.7±9.1)

作者:王小中;冯文莉;刘兴;曹唯希;黄宗干

来源:癌症 2003 年 22卷 9期

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作者:
王小中;冯文莉;刘兴;曹唯希;黄宗干
来源:
癌症 2003 年 22卷 9期
标签:
S期激酶相关蛋白2 反义寡核苷酸 细胞周期 慢性粒细胞白血病
背景与目的:泛素-蛋白酶体途径是真核细胞中选择性降解短寿命蛋白的重要途径.S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)是此途径中的一个重要组件,它是决定细胞周期素依赖性激酶抑制因子p27降解的关键蛋白.近年来,在实体瘤的研究中发现Skp2是癌蛋白,能促进癌细胞的细胞周期进展,但在白血病细胞恶性增殖中所起的作用还未见报道.本实验旨在研究Skp2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)对白血病细胞系K562细胞生长和增殖的影响及其可能的机制.方法:Skp2反义寡核苷酸和K562细胞共同培养,通过显微镜下观察、四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验观察K562细胞生长和增殖,流式细胞术分析细胞周期,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chainreaction,RT-PCR)和细胞免疫化学测定Skp2 mRNA、蛋白及p27 mRNA、蛋白的表达.结果:Skp2反义寡核苷酸处理后,K562细胞增殖受抑,细胞周期阻滞于Go/G1期[Skp2 ASODN组(39.7±9.1)