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背景与目的:细胞凋亡异常是肿瘤细胞产生耐药性的关键因素之一. Smac(second mitochondria-derived activator of caspases,Smac或称 DIABLO)是新近发现的一种凋亡调节基因,在介导化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡中起重要作用.本研究旨在观察 Smac基因过表达对胃癌细胞株化疗敏感性的影响.方法:采用脂质体 GeneSHUTTLE-40介导的方法,将 Smac基因转入胃癌细胞 MKN-45, RT-PCR和 Western blot法检测癌细胞中 Smac的表达;选用顺铂 (1、 5、 10 μ g/ml)、丝裂霉素 (0.1、 1、 10 μ g/ml)和姜黄素 (10、 20、 40 μ mol/L)分别处理转染前后的胃癌细胞,四甲基偶氮唑蓝( MTT)比色法检测细胞增殖活性,倒置显微镜下观察细胞形态变化并摄影, Annexin V-FITC和碘化丙啶双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:同未转染对照组比较,转染外源性 Smac基因后 MKN-45细胞 Smac mRNA和蛋白表达水平显著增高( P< 0.01);各浓度顺铂、丝裂霉素和姜黄素处理 24 h后,细胞生长抑制率分别 增加 10.10

作者:郑丽端;童强松;陶凯雄;汪良;张波

来源:癌症 2004 年 23卷 4期

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作者:
郑丽端;童强松;陶凯雄;汪良;张波
来源:
癌症 2004 年 23卷 4期
标签:
Smac基因 胃癌 细胞凋亡 化疗敏感性
背景与目的:细胞凋亡异常是肿瘤细胞产生耐药性的关键因素之一. Smac(second mitochondria-derived activator of caspases,Smac或称 DIABLO)是新近发现的一种凋亡调节基因,在介导化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡中起重要作用.本研究旨在观察 Smac基因过表达对胃癌细胞株化疗敏感性的影响.方法:采用脂质体 GeneSHUTTLE-40介导的方法,将 Smac基因转入胃癌细胞 MKN-45, RT-PCR和 Western blot法检测癌细胞中 Smac的表达;选用顺铂 (1、 5、 10 μ g/ml)、丝裂霉素 (0.1、 1、 10 μ g/ml)和姜黄素 (10、 20、 40 μ mol/L)分别处理转染前后的胃癌细胞,四甲基偶氮唑蓝( MTT)比色法检测细胞增殖活性,倒置显微镜下观察细胞形态变化并摄影, Annexin V-FITC和碘化丙啶双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:同未转染对照组比较,转染外源性 Smac基因后 MKN-45细胞 Smac mRNA和蛋白表达水平显著增高( P< 0.01);各浓度顺铂、丝裂霉素和姜黄素处理 24 h后,细胞生长抑制率分别 增加 10.10