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背景与目的:有研究表明,S100A13基因与肿瘤的发生有关,而S100A13基因在人甲状腺组织中高表达.本研究旨在探讨S100A13基因过表达对甲状腺癌TT细胞增殖特性的影响.方法:应用Lipofectamine 2000将真核表达载体pCDNA3.1/NT-GFP-S100A13和空载体pCDNA3.1/NT-GFP导入TT细胞,经G418抗性筛选得到稳定的克隆并扩大培养成细胞系,激光共聚焦显微镜观察外源性S100A13蛋白在细胞中的定位.采用real-time RT-PCR和Western blot鉴定稳定过表达S100A13的TT细胞.分别应用细胞生长曲线、流式细胞术方法检测过表达S100A13基因对TT细胞生长速率和细胞周期的影响.结果:成功建立了稳定过表达S100A13和空载体的细胞系TT-S100A13-GFP、TT-GFP.分别将1×104个TT-S100A13-GFP、TT-GFP和TT细胞培养7 d后,各组细胞数目分别为(2.30±0.24)×105个、(1.40±0.25)×105个和(1.50±2.20)×105个(P<0.05);TT-S100A13-GFP、TT-GFP和TT细胞经流式细胞仪检测S期的细胞比例分别为(6.47±0.14)

作者:曹仁贤;田利娜;文芳;刘星;钟警;文格波

来源:癌症 2008 年 27卷 8期

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作者:
曹仁贤;田利娜;文芳;刘星;钟警;文格波
来源:
癌症 2008 年 27卷 8期
标签:
S100A13基因 甲状腺肿瘤 TT细胞 基因转染 细胞增殖 细胞周期
背景与目的:有研究表明,S100A13基因与肿瘤的发生有关,而S100A13基因在人甲状腺组织中高表达.本研究旨在探讨S100A13基因过表达对甲状腺癌TT细胞增殖特性的影响.方法:应用Lipofectamine 2000将真核表达载体pCDNA3.1/NT-GFP-S100A13和空载体pCDNA3.1/NT-GFP导入TT细胞,经G418抗性筛选得到稳定的克隆并扩大培养成细胞系,激光共聚焦显微镜观察外源性S100A13蛋白在细胞中的定位.采用real-time RT-PCR和Western blot鉴定稳定过表达S100A13的TT细胞.分别应用细胞生长曲线、流式细胞术方法检测过表达S100A13基因对TT细胞生长速率和细胞周期的影响.结果:成功建立了稳定过表达S100A13和空载体的细胞系TT-S100A13-GFP、TT-GFP.分别将1×104个TT-S100A13-GFP、TT-GFP和TT细胞培养7 d后,各组细胞数目分别为(2.30±0.24)×105个、(1.40±0.25)×105个和(1.50±2.20)×105个(P<0.05);TT-S100A13-GFP、TT-GFP和TT细胞经流式细胞仪检测S期的细胞比例分别为(6.47±0.14)