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目的克隆人B7.1全长cDNA及构建相应的逆转录病毒表达载体。方法应用逆转录多聚酶链反应从人B淋巴瘤细胞系Raji中克隆B7.1全长cDNA,再将cDNA插入到质粒pBluescript中,经自动荧光测序证实无误后,再通过定向克隆构建相应的逆转录病毒表达载体PLXSNhB7。结果逆转录多聚酶链反应扩增产物长度与预期的889 bp一致;用M13正、反向引物进行荧光测序证实,克隆出的序列与GenBank的B7.1 cDNA序列完全一致;人B7.1全长cDNA被成功地插入到质粒PLXSN中。结论人B7.1全长cDNA的克隆及相应逆转录病毒表达载体的构建为今后应用B7.1进行肿瘤免疫基因治疗提供了可能性。

作者:杨旭伟;陈元仲;林振兴

来源:福建医科大学学报 2001 年 35卷 2期

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作者:
杨旭伟;陈元仲;林振兴
来源:
福建医科大学学报 2001 年 35卷 2期
标签:
B7.1 基因 克隆 逆转录病毒 基因疗法 抗原,CD80 抗原,CD28
目的克隆人B7.1全长cDNA及构建相应的逆转录病毒表达载体。方法应用逆转录多聚酶链反应从人B淋巴瘤细胞系Raji中克隆B7.1全长cDNA,再将cDNA插入到质粒pBluescript中,经自动荧光测序证实无误后,再通过定向克隆构建相应的逆转录病毒表达载体PLXSNhB7。结果逆转录多聚酶链反应扩增产物长度与预期的889 bp一致;用M13正、反向引物进行荧光测序证实,克隆出的序列与GenBank的B7.1 cDNA序列完全一致;人B7.1全长cDNA被成功地插入到质粒PLXSN中。结论人B7.1全长cDNA的克隆及相应逆转录病毒表达载体的构建为今后应用B7.1进行肿瘤免疫基因治疗提供了可能性。