目的 探讨miR-383对血管生成的影响及分子机制. 方法 通过生物信息学数据库进行预测,寻找miR-383调控的靶基因,挑选与血管生成相关的靶基因作为候选基因,采用荧光素酶报告基因检测系统进行验证.利用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western-blot等实验证实miR-383对候选基因表达的靶向调控;通过体外血管内皮细胞成管实验检测miR-383对血管生成的影响. 结果 生物信息学预测显示,miR-383靶向多个与血管生成相关的基因;荧光素酶报告基因实验证实,miR-383可通过结合血管内皮生成因子(VEGFA)基因3'-非翻译区(3'-UTR)而抑制其表达;过表达miR-383并不影响VEGFA的mRNA转录水平,而只是在蛋白水平下调VEGFA表达;体外血管生成实验表明,miR 383所介导的VEGFA表达下调可明显抑制血管生成. 结论 miR-383可通过靶向结合VEGFA基因的3'-UTR,抑制其翻译效率而下调VEGFA的表达,并抑制内皮细胞血管生成能力.
作者:徐燕;黄建航;郑志平;洪小川;何艳
来源:福建医科大学学报 2019 年 53卷 2期