目的 构建一种新的基因-病毒治疗系统.方法 通过基因操作技术将目的基因表达盒mCMV启动子+p53基因+SV40polyA插入腺病毒E1A基因受端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控、E1B基因受缺氧反应元件(HRE)启动子调控的增殖病毒载体质粒pSG500的E1 A下游,得到腺病毒质粒pSG500-p53;通过pSG500-p53与5型腺病毒右臂的质粒pBHGE3在293细胞中同源重组得到重组病毒CNHK500-p53;利用Western blot和ELISA法检测病毒E1A、E1B基因和p53抑癌基因的表达;TCID50方法测定病毒滴度;通过增殖实验观察重组病毒的选择性增殖能力;应用细胞病理效应(CPE)实验检测病毒抗肿瘤作用.结果 CNHK500-p53的病毒滴度为2×1010 pfu/ml,增殖实验证实CNHK500-p53可以选择性地在端粒酶阳性和缺氧微环境的肝癌细胞中增殖,CNHK500-p53所携带的p53基因在肝癌细胞株中的表达量388±34.6μg/L明显高于非增殖型腺病毒载体Ad-p53的76.3±13.17μg/L(P＜0.005),并显示了较强的抗肿瘤效应.结论 CNHK500-p53是一种具备治疗肝癌潜力的新型基因-病毒治疗系统.
作者：赵红川；张琪；陈颖华；陆敏强；杨扬；蔡常洁；陈规划
来源：肝胆外科杂志 2006 年 14卷 6期
