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目的 探讨蛋白磷酸酶2A (PP2A)的表达在肝枯否细胞(KC)核因子-κB(NF-κB)活化中的作用,对KC核因子-κB活化的表达调控机制进行理论探索.方法 采用胶原酶灌注和percol密度梯度离心法分离得到高纯度大鼠KC,分为内毒素(LPS)及二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)+LPS分别与KC体外共培养组及一个阴性对照组,24 h后收集各组细胞和培养上清,分别采用RT-PCR法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测KC中PP2A、NF-κB p65及TNF-α的表达和培养上清中TNF-α的含量.结果 LPS组细胞培养上清中TNF-α含量显著高于对照组(P<0.01),KC中NF-κB p65和TNF-α的表达也明显增强(P<0.01),但对照组的PP2A表达较LPS组强(P <0.01);PDTC +LPS组KC中NF-κB p65和TNF-α的表达较LPS组明显减弱(P<0.01),但PDTC +LPS组PP2A的表达较LPS组有明显增强(P<0.05).结论 LPS能够显著增强KC中NF-κB p65的表达进而增强其TNF-α的表达,这种增强作用可能与PP2A的表达被抑制有关;用PDTC抑制NF-κB活性能够降低KC中TNF-a的表达,这种抑制作用可能与PP2A的表达增强有关;PP2A可能参与了肝枯否细胞核因子-κB活化的表达调控.

作者:詹志林;卞建民;孔胜兵

来源:肝胆外科杂志 2011 年 19卷 6期

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作者:
詹志林;卞建民;孔胜兵
来源:
肝胆外科杂志 2011 年 19卷 6期
标签:
核因子-κB 蛋白磷酸酶2A 肿瘤坏死因子-α 枯否细胞
目的 探讨蛋白磷酸酶2A (PP2A)的表达在肝枯否细胞(KC)核因子-κB(NF-κB)活化中的作用,对KC核因子-κB活化的表达调控机制进行理论探索.方法 采用胶原酶灌注和percol密度梯度离心法分离得到高纯度大鼠KC,分为内毒素(LPS)及二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)+LPS分别与KC体外共培养组及一个阴性对照组,24 h后收集各组细胞和培养上清,分别采用RT-PCR法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测KC中PP2A、NF-κB p65及TNF-α的表达和培养上清中TNF-α的含量.结果 LPS组细胞培养上清中TNF-α含量显著高于对照组(P<0.01),KC中NF-κB p65和TNF-α的表达也明显增强(P<0.01),但对照组的PP2A表达较LPS组强(P <0.01);PDTC +LPS组KC中NF-κB p65和TNF-α的表达较LPS组明显减弱(P<0.01),但PDTC +LPS组PP2A的表达较LPS组有明显增强(P<0.05).结论 LPS能够显著增强KC中NF-κB p65的表达进而增强其TNF-α的表达,这种增强作用可能与PP2A的表达被抑制有关;用PDTC抑制NF-κB活性能够降低KC中TNF-a的表达,这种抑制作用可能与PP2A的表达增强有关;PP2A可能参与了肝枯否细胞核因子-κB活化的表达调控.