目的 探讨长链非编码RNA(long non?coding RNA,lncRNA)牛磺酸上调基因1(taurine upregulated 1,TUG1)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及成骨/牙本质向分化的影响.方法 分离培养hDPSCs,流式细胞术检测细胞表面抗原CD44、CD45、CD73、CD90、CD133、STRO?1,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色鉴定其分化能力.hDPSCs成骨诱导0、7、14 d收集RNA,qRT?PCR检测TUG1的表达水平.构建携带sh?TUG1的慢病毒载体pSLenti?U6?shRNA(TUG1)?CMV?EGFP?F2A?Puro?WPRE,并通过感染hDPSCs及嘌呤霉素筛选建立稳定沉默TUG1的hDPSCs细胞系,CCK?8检测hDPSCs增殖能力,ALP和茜素红染色及定量检测hDPSCs的早期ALP活性和晚期矿化结节的形成,qRT?PCR和Western blot检测成牙本质及成骨分化相关的基因牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白?1(dentine matrix protein 1,DMP?1)、Runt相关转录因子2(runt?related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因及蛋白表达变化.结果 成功分离、培养和鉴定hDPSCs,hDPSCs成骨向分化过程中TUG1的表达明显增加(P<0.05).沉默TUG1后hDPSCs的增殖能力下降(P<0.05),ALP活性降低,矿化结
作者:蒋雅欣;张华;孙凌寒;李适廷;冯浩
来源:口腔疾病防治 2022 年 30卷 12期