目的 探讨牛磺酸上调基因1 (taurine-upregulated gene 1,TUG1)在人绒毛膜癌JEC-3细胞增殖、迁移和凋亡中的作用.方法 采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术构建TUG1慢病毒载体.将对数生长期人绒毛膜癌JEG-3细胞随机分为空白对照组(不作任何处理)、阴性对照组(转染阴性对照靶序列慢病毒载体)和转染组(转染siRNA-TUG1慢病毒载体).采用实时荧光定量PCR法检测3组TUG1 mRNA、caspase-3 mRNA、caspase 9 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测3组TUG1、caspase-3、caspase-9蛋白相对表达量,采用Transwell小室试验检测3组培养24 h细胞侵袭能力,采用CCK-8法检测3组细胞培养72 h吸光度值,采用流式细胞术检测3组培养72 h细胞凋亡率.结果 构建siRNA-TUG1载体的慢病毒滴度为3×108TU/mL;转染72 h,转染组TUG1 mRNA、caspase-3 mRNA、caspase-9 mRNA相对表达量(0.42±0.02、0.31±0.01、0.21±0.01)低于阴性对照组(1.09±0.03、1.29±0.03、1.02±0.01)和空白对照组(1.01±0.01、1.02±0.02、1.00±0.01) (P<0.05),TUG1、caspase 3、caspase-9蛋白相对表达量(0.24±0.07、0.49±0.23、0.11±0.02)低于阴性对照组(7.32±0.05、10.12±1.47、9.98±2.78)和空白对照组(6.08±0.19、9.88±0.93、9.91±1.44)
作者:谢环;田洁;黄娅芬
来源:中华实用诊断与治疗杂志 2019 年 33卷 1期