目的 探讨基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)基因转染体外培养的人成釉细胞瘤(AM) 细胞侵袭性生物学行为的改变,进一步研究MMP-2、TIMP-2与AM局部侵袭性的关系.方法 pcDNA3.1(+)/GFP-TIMP-2质粒转染人AM细胞.空白对照组:不加任何处理因素;脂质体对照组:加入4 μL Lipo-fe ctamine 2000和250 μL Opti-MEMⅠ混合物;转染阴性载体对照组(P0):转染2 μg阴性对照质粒pcDNA3.1(+)/GFP;实验组:分别转染不同浓度的质粒pcDNA3.1(+)/GFP-TIMPI 1 μg(P1)、2 μg(P2)、3 μg(P3).倒置相差荧光显微镜观察转染情况,流式细胞仪测定转染效率.明胶酶谱法检测基质蛋白酶-2(MMP-2)的活性.逆向明胶酶谱法检测TIMP-2的活性.RT-PCR分析MMP-2 以及TIMP-2 mRNA的表达.Western blot分析MMP-2及TIMP-2蛋白的表达情况.三维培养观察分析细胞生长状况.Transwell 微侵袭分析.结果 与空白对照组比较,不同浓度质粒转染组的MMP-2均有不同程度的抑制,差异有显著性(P＜0.05); 72 h MMP-2抑制率为54.38
作者：张磊涛；李伟忠；黄洪章
来源：广东医学 2011 年 32卷 10期
