目的 比较药物诱导和耐药基因转染两种方法 所建立的人食管癌顺铂耐药细胞系的不同特点.方法 顺铂(cDDP)中等浓度、间歇作用法历时9个月建立食管癌耐药细胞系Ec9706/cDDP;同时采用脂质体转染法将人野生型DNA聚合酶β(polβ)的重组绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-AC3转染入食管癌细胞Ec9706,经G418筛选得到稳定转染细胞系Ec9706-AC3.荧光显微镜观察转染效果,普通倒置显微镜观察细胞形态变化.绘制生长曲线,计算群体倍增时间.RT-PCR方法 检测细胞中polβ mRNA的表达水平,MTT法测细胞对顺铂的敏感性,并观察冻存复苏、撤药培养对耐药性的影响.结果 两种方法 所获耐药细胞与亲本细胞相比形态无明显变化,polβ mRNA表达均增加.Ec9706/cDDP耐药指数为15.70±1.16,冻存复苏对耐药指数影响不大,而撤药培养可使耐药性降低,细胞群体倍增时间延长;Ec9706-AC3细胞耐药指数为1.78±0.67,不受冻存复苏、撤药培养的影响,细胞群体倍增时间不变.结论 用不同方法 成功建立两种人食管癌顺铂耐药细胞,不同方法 获得的耐药细胞生物学特性有所不同.
作者：李敏；轩小燕；黄玉敏；臧文巧；赵国强
来源：广东医学 2012 年 33卷 6期
