目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在克唑替尼诱导EML4-ALK阳性肺腺癌细胞株H2228凋亡中的作用.方法 (1)用10、30、90、270、810 nmol/L浓度梯度的克唑替尼处理H2228细胞48 h,MTF比色法测定细胞增殖能力.(2)用100、200、300 nmol/L克唑替尼处理H2228细胞48 h,Annexin V流式细胞仪检测凋亡细胞.(3)RT-PCR实验:①采用50、100、200、400、800μmol/L浓度的低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)作用H2228细胞24 h,观察HIF-1α的mRNA表达水平变化.②常氧对照组(0.5% DMSO培养基48 h)、常氧+克唑替尼组(0.5% DMSO培养基24 h+500 nmol/L克唑替尼24 h)、低氧对照组(200 μm/L CoCl224 h+0.5% DMSO培养基24 h)、低氧+克唑替尼组(200 μm/L CoCl2 24 h+500 nmol/L克唑替尼24 h),采用RT-PCR方法检测各组细胞HIF-1α、Akt、VEGF mRNA的表达水平.结果 (1) MTT实验结果示:随着克唑替尼药物浓度升高,H2228细胞增殖抑制率逐渐升高,呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC50)为335 nmol/L.(2)凋亡实验结果示:H2228细胞凋亡率随克唑替尼浓度增加而升高,呈剂量依赖性.(3)RT-PCR实验结果示:①随着CoGl2浓度的增加,HIF-1α的mRNA表达水平逐渐下降,呈剂量及时间依赖性,于200 μm/L浓度时下降最明显.②与对照组相比,无论是在常氧还是低氧,克唑
作者:潘星辰;周韶璋;戴辉;韦江;彭海燕;宋向群
来源:广东医学 2014 年 35卷 13期