目的 探讨人微小非编码RNA-183(Hsa-miR-183)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在食管癌组织和食管鳞癌细胞株Eca109中的表达及相互调控关系.方法 采用RT-PCR法检测食管癌组织、食管正常组织、正常食管上皮细胞Het-1A和Eca109细胞株中Hsa-miR-183与MMP-9的相对表达水平.构建人Hsa-miR-183的真核表达载体质粒PmiR-183,以脂质体2000转染至Eca109细胞,Eca109细胞分为3组:空白对照组不含任何质粒或脂质体,阴性对照组含空质粒2 000 μg/mL、脂质体20 μg/mL,PmiR-183组含PmiR-183 20μg/mL.构建psiCHECK-2-MMP-9-3'UTR载体.WST-8法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测Hsa-miR-183及MMP-9 mRNA的表达水平,Western blot法检测MMP-9蛋白的表达水平;荧光素酶报告基因实验验证Hsa-miR-183与MMP-9的靶位关系,设计针对MMP-9序列的小干扰RNA,转染Eca109细胞株,检测Hsa-miR-183的相对表达水平.结果 Hsa-miR-183在食管癌组织和Eca109细胞株中的相对表达水平较食管正常组织和Het-1A细胞株中低(P＜0.05),MMP-9在食管癌组织和Eca109细胞株中的相对表达水平较食管正常组织及Het-1A细胞株中高(P＜0.05).与阴性对照组比较,PmiR-183组对Eca109细胞24、48、72 h的增殖抑制率差异有统计学意义(P＜0.05),呈时间-效应关系;psiCHECK-2-MMP-9-3'

作者：梁宇强；王茂生；梁清；刘文健；黄健

来源：广东医学 2016 年 37卷 7期