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目的 探讨构建过氧化氢(H2O2)诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的方法.方法 不同浓度H2O2处理人卵巢颗粒细胞COV434,采用Western blot检测Caspase-3表达,流式细胞仪和DAPI/TUNEL双染色法检测细胞凋亡情况,H2DCF-DA检测细胞内活性氧族(ROS)水平,通过量效关系和时效关系来确定H2O2的最佳作用条件.结果 1 ~ 1.5 mmol/L浓度H2 O2处理COV434细胞2~4h后Caspase-3表达量升高最明显.随着H2 O2浓度增加及作用时间的延长细胞凋亡率不断升高.细胞内ROS水平随着H2 O2浓度的增加而增加.1.5mmol/L浓度H2 O2处理1h后细胞内ROS水平上升最明显.结论 H2 O2诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的最适宜浓度为1 ~ 1.5 mmol/L,采用细胞凋亡情况评价作用时间是2~4h,采用ROS评价作用时间为1h.

作者:刘建;聂广宁;杨洪艳

来源:广东医学 2017 年 38卷 7期

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作者:
刘建;聂广宁;杨洪艳
来源:
广东医学 2017 年 38卷 7期
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过氧化氢 人卵巢颗粒细胞COV434 氧化应激模型 hydrogen peroxide human ovaria granulosa cells COV434 oxidative stress model
目的 探讨构建过氧化氢(H2O2)诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的方法.方法 不同浓度H2O2处理人卵巢颗粒细胞COV434,采用Western blot检测Caspase-3表达,流式细胞仪和DAPI/TUNEL双染色法检测细胞凋亡情况,H2DCF-DA检测细胞内活性氧族(ROS)水平,通过量效关系和时效关系来确定H2O2的最佳作用条件.结果 1 ~ 1.5 mmol/L浓度H2 O2处理COV434细胞2~4h后Caspase-3表达量升高最明显.随着H2 O2浓度增加及作用时间的延长细胞凋亡率不断升高.细胞内ROS水平随着H2 O2浓度的增加而增加.1.5mmol/L浓度H2 O2处理1h后细胞内ROS水平上升最明显.结论 H2 O2诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激模型的最适宜浓度为1 ~ 1.5 mmol/L,采用细胞凋亡情况评价作用时间是2~4h,采用ROS评价作用时间为1h.