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目的 观察银杏内酯B(GB)对H2O2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法 将对数生长期的H9C2心肌细胞随机分为5组:对照组、H2O2 (200 μmol/L)干预组、GB (50、100和200 μmol/L)+H2O2(200μmol/L)干预组,每组设10个复孔.经药物干预16h后,采用MTT法检测细胞存活率;测定培养液中心肌酶(AST、CPK、LDH)活性;检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,采用RT-PCR法检测细胞中AKT mRNA、Bcl-2mRNA、Bax mRNA表达,计算Bcl-2/Bax表达比值,Western blot法检测细胞核因子-κB(NF-κB)蛋白表达并进行半定量分析,比色法检测细胞中Caspase-3、Caspase-9活性.结果 与H2O2干预组比较,GB(100、200 μmol/L)+H2O2(200 μmol/L)干预组细胞存活率显著升高(P<0.01),培养液中AST、CPK、LDH活性显著降低(P< 0.05或P<0.01),细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01);GB干预组细胞凋亡状况明显好转,其中GBβ(100、200 μmol/L)+H2O2(200μ.mol/L)干预组细胞凋亡率显著降低(P<0.01),AKT mRNA和bcl-2 mRNA表达显著上调(P<0.05或P< 0.01),BaxmRNA表达显著下调(P<0.01),Bcl-2/Bax表达比值显著升高(P<0.01),细胞中NF-kB蛋白

作者:李亮;彭辉;孙立峰;田延冰;孟剑锋;谢兰兰

来源:中国中医急症 2016 年 25卷 6期

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作者:
李亮;彭辉;孙立峰;田延冰;孟剑锋;谢兰兰
来源:
中国中医急症 2016 年 25卷 6期
标签:
银杏内酯B H9C2心肌细胞 过氧化氢 凋亡 机制 Ginkgolide B H9C2 cardiomyocytes H2O2 Apoptosis Mechanism
目的 观察银杏内酯B(GB)对H2O2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法 将对数生长期的H9C2心肌细胞随机分为5组:对照组、H2O2 (200 μmol/L)干预组、GB (50、100和200 μmol/L)+H2O2(200μmol/L)干预组,每组设10个复孔.经药物干预16h后,采用MTT法检测细胞存活率;测定培养液中心肌酶(AST、CPK、LDH)活性;检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,采用RT-PCR法检测细胞中AKT mRNA、Bcl-2mRNA、Bax mRNA表达,计算Bcl-2/Bax表达比值,Western blot法检测细胞核因子-κB(NF-κB)蛋白表达并进行半定量分析,比色法检测细胞中Caspase-3、Caspase-9活性.结果 与H2O2干预组比较,GB(100、200 μmol/L)+H2O2(200 μmol/L)干预组细胞存活率显著升高(P<0.01),培养液中AST、CPK、LDH活性显著降低(P< 0.05或P<0.01),细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01);GB干预组细胞凋亡状况明显好转,其中GBβ(100、200 μmol/L)+H2O2(200μ.mol/L)干预组细胞凋亡率显著降低(P<0.01),AKT mRNA和bcl-2 mRNA表达显著上调(P<0.05或P< 0.01),BaxmRNA表达显著下调(P<0.01),Bcl-2/Bax表达比值显著升高(P<0.01),细胞中NF-kB蛋白