目的 以FTY720-P作用于成骨细胞后,分析相关蛋白和基因表达的变化,明确FTY720-P对成骨细胞的作用机制.方法 取Wistar大鼠乳鼠颅盖骨进行成骨细胞原代培养.将不同浓度的FTY720-P(0、200、300、400 ng/mL)作用于成骨细胞,MTT试验和流式细胞术进行生长速率和细胞周期的检测,碱性磷酸酶(ALP)染色和钙化结节染色对比FTY720-P用药前后对细胞形态学功能的影响,并分别采用ELISA、Western blot和Real Time RT-PCR检测相关蛋白和基因的表达.结果 MTT显示FTY720-P对细胞生长影响不大.流式细胞术结果提示,细胞阻滞在G2期,对周期影响不大.ALP染色显示对照组蓝紫色颗粒更加明显;茜素红染色可见数量较多和更加明显的钙化结节.PCR结果中ALP的表达是下调的,骨钙素(OCN)和胰岛素样生长因子(IGF)的表达是上调的;而在ELISA实验中,OCN和IGF的分泌是增加的,Western blot检测中,胞外胶原蛋白I型分泌也增加,而在ALP活性实验中,胞内ALP活性是降低的.结论 FTY720-P可以促进成骨细胞细胞外基质的成熟和矿化,但对细胞增殖和周期没影响.
作者：陈智颖；左洁仪；兰万利；邝艺臻；刘晓春；黄东
来源：广东医学 2017 年 38卷 13期
