目的 研究轮状病毒(RV)感染对表达NHE3的Caco-2细胞表面NHE3蛋白水平及其生物活性的影响.方法 构建表达NHE3的Caco-2细胞模型,构建好的表达HA-NHE3的单层极化Caco-2细胞分为CT组和RV组,分别加入等体积无血清培养液和RV病毒液(MOI10),在37℃、5％ CO2条件下孵育60min,进行检测.BCECF-AM法和细胞表面NHE3生物素化法测定Na+-H+交换活性和细胞表面NHE3蛋白水平.结果 Na+-H+交换活性检测结果显示,与CT组(0.412±0.026)相比,RV感染可引起细胞NHE3的生物活性明显降低(0.147±0.011) (P＜0.01).细胞表面NHE3生物素化法检测发现,CT组和RV组间细胞NHE3蛋白总量没有发生明显变化(0.727±0.037 vs0.732±0.020),差异无统计学意义(P＞0.05).然而,与CT组(0.374±0.015)相比,RV感染表达HA-NHE3的单层极化Caco-2细胞60 min后,细胞表面NHE3的表达明显降低(0.204±0.009),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 RV感染性腹泻可能与调控肠道细胞表面NHE3的蛋白水平及其生物活性有关.
作者：王昕；范媛媛；王鹏；李玲；潘雪；范程程；孟雨姗；蒋莉莉
来源：广东医学 2018 年 39卷 7期
