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目的 研究轮状病毒(RV)感染对表达钠氢交换蛋白3(Na+-H+exchanger 3,NHE3)的Caco-2细胞表面NHE3蛋白水平和生物活性的影响及其调控机制.方法 构建表达NHE3的Caco-2细胞模型,分为对照组(CTL组)、RV组、网格蛋白(clathrin)拮抗剂氯丙嗪(CPZ)组和CPZ+RV组,采用BCECF-AM法和细胞表面NHE3生物素化法测定Na+-H+交换活性和细胞表面NHE3水平,Western blot法测定细胞clathrin水平.结果 与CTL组相比,RV感染可引起细胞Na+-H+交换活性以及细胞表面NHE3水平明显降低,此抑制作用不能被clathrin拮抗剂CPZ完全抵消,此外RV感染可引起clathrin水平升高,这一作用也可被CPZ取消.结论 RV感染对NHE3水平及生物活性的调控与clathrin依赖性内吞途径有一定关系,但也可能还受到其他内吞途径的影响.

作者:牛美兰;裴岩岩;王鹏;范媛媛;陈长英;王世广;袁武

来源:中国感染与化疗杂志 2018 年 18卷 6期

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作者:
牛美兰;裴岩岩;王鹏;范媛媛;陈长英;王世广;袁武
来源:
中国感染与化疗杂志 2018 年 18卷 6期
标签:
轮状病毒 钠-氢交换蛋白3 网格蛋白依赖性内吞途径 rotavirus Na+-H+ exchanger 3 clathrin dependent endocytosis pathway
目的 研究轮状病毒(RV)感染对表达钠氢交换蛋白3(Na+-H+exchanger 3,NHE3)的Caco-2细胞表面NHE3蛋白水平和生物活性的影响及其调控机制.方法 构建表达NHE3的Caco-2细胞模型,分为对照组(CTL组)、RV组、网格蛋白(clathrin)拮抗剂氯丙嗪(CPZ)组和CPZ+RV组,采用BCECF-AM法和细胞表面NHE3生物素化法测定Na+-H+交换活性和细胞表面NHE3水平,Western blot法测定细胞clathrin水平.结果 与CTL组相比,RV感染可引起细胞Na+-H+交换活性以及细胞表面NHE3水平明显降低,此抑制作用不能被clathrin拮抗剂CPZ完全抵消,此外RV感染可引起clathrin水平升高,这一作用也可被CPZ取消.结论 RV感染对NHE3水平及生物活性的调控与clathrin依赖性内吞途径有一定关系,但也可能还受到其他内吞途径的影响.