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目的 研究轮状病毒(RV)感染对表达钠/氢交换因子3(NHE3)的Caco-2细胞表面NHE3蛋白水平和生物活性的影响及其调控机制.方法 构建表达NHE3的Caco-2细胞模型,分为对照组(CTL组)、RV组、Cdc42拮抗剂Pirl-1组和Pirl-1+RV组.BCECF-AM法和细胞表面NHE3生物素化法测定Na+-H+交换活性和细胞表面NHE3蛋白水平,Western blot法测定细胞Cdc42蛋白水平,免疫共沉淀法检测Cdc42与NHE3的相互作用.结果 与CTL组相比,RV感染可引起细胞Na+-H+交换活性以及细胞表面NHE3蛋白水平明显降低,此抑制作用可被Cdc42拮抗剂Pirl-1拮抗,此外RV感染可引起Cdc42蛋白水平升高,并且也可增加Cdc42蛋白与NHE3蛋白的结合,这些作用也可被Pirl-1拮抗.结论 RV感染可能通过Cdc42依赖性内吞途径调控NHE3蛋白水平及生物活性.

作者:牛美兰;王鹏;陈长英;冯荣芳;陈梓潇;焦佳伟;李媛媛;许昊宇;李玲

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2018 年 38卷 3期

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作者:
牛美兰;王鹏;陈长英;冯荣芳;陈梓潇;焦佳伟;李媛媛;许昊宇;李玲
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2018 年 38卷 3期
标签:
轮状病毒 钠/氢交换因子3 Cdc42依赖性内吞途径 Rotavirus Na+/H+exchanger 3 Cdc42-dependent endocytosis pathway
目的 研究轮状病毒(RV)感染对表达钠/氢交换因子3(NHE3)的Caco-2细胞表面NHE3蛋白水平和生物活性的影响及其调控机制.方法 构建表达NHE3的Caco-2细胞模型,分为对照组(CTL组)、RV组、Cdc42拮抗剂Pirl-1组和Pirl-1+RV组.BCECF-AM法和细胞表面NHE3生物素化法测定Na+-H+交换活性和细胞表面NHE3蛋白水平,Western blot法测定细胞Cdc42蛋白水平,免疫共沉淀法检测Cdc42与NHE3的相互作用.结果 与CTL组相比,RV感染可引起细胞Na+-H+交换活性以及细胞表面NHE3蛋白水平明显降低,此抑制作用可被Cdc42拮抗剂Pirl-1拮抗,此外RV感染可引起Cdc42蛋白水平升高,并且也可增加Cdc42蛋白与NHE3蛋白的结合,这些作用也可被Pirl-1拮抗.结论 RV感染可能通过Cdc42依赖性内吞途径调控NHE3蛋白水平及生物活性.