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目的 体外环境下,探究白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对成骨样MG63细胞的核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)表达的影响.方法 单独或联合使用IL-1β和(或)TNF-α刺激成骨样MG63细胞24 h,分别设为IL-1β干预组、TNF-α干预组、联合干预组(TNF-α及IL-1β联合干预),另设无任何刺激的空白组.Western blot和RT-PCR法检测RANKL和OPG蛋白及mRNA的表达.另用RANKL序列特异性小干扰RNA(siRNA)及非靶序列siRNA,经过Liopfc-ctamine 2000转染MG63细胞,非靶序列siRNA转染的细胞为阴性对照组,然后使用IL-1β和TNF-α联合刺激24 h,通过Western blot法检测RANKL和OPG蛋白的表达.结果 与空白组相比,IL-1β干预组和联合干预组的RANKL和OPG表达量明显提升(P<0.05).IL-1β及TNF-α联合干预24 h后,RANKL-siRNA转染后的MG63细胞RANKL和OPG蛋白和mRNA表达较非靶序列siRNA转染的阴性对照组显著下调(P<0.05).结论 IL-1β和TNF-α通过改变RANKL/OPG影响骨代谢,RANKL沉默可以显著降低RANKL蛋白表达,进而影响RANKL/OPG.

作者:陈宇雄;杨詠嘉;黄元瑾

来源:广东医学 2018 年 39卷 16期

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陈宇雄;杨詠嘉;黄元瑾
来源:
广东医学 2018 年 39卷 16期
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白细胞介素-1β 肿瘤坏死因子-α 核因子κB受体活化因子配体 骨保护素 成骨样细胞MG63
目的 体外环境下,探究白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对成骨样MG63细胞的核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)表达的影响.方法 单独或联合使用IL-1β和(或)TNF-α刺激成骨样MG63细胞24 h,分别设为IL-1β干预组、TNF-α干预组、联合干预组(TNF-α及IL-1β联合干预),另设无任何刺激的空白组.Western blot和RT-PCR法检测RANKL和OPG蛋白及mRNA的表达.另用RANKL序列特异性小干扰RNA(siRNA)及非靶序列siRNA,经过Liopfc-ctamine 2000转染MG63细胞,非靶序列siRNA转染的细胞为阴性对照组,然后使用IL-1β和TNF-α联合刺激24 h,通过Western blot法检测RANKL和OPG蛋白的表达.结果 与空白组相比,IL-1β干预组和联合干预组的RANKL和OPG表达量明显提升(P<0.05).IL-1β及TNF-α联合干预24 h后,RANKL-siRNA转染后的MG63细胞RANKL和OPG蛋白和mRNA表达较非靶序列siRNA转染的阴性对照组显著下调(P<0.05).结论 IL-1β和TNF-α通过改变RANKL/OPG影响骨代谢,RANKL沉默可以显著降低RANKL蛋白表达,进而影响RANKL/OPG.