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目的:通过研究基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor?1, SDF?1)对小鼠关节软骨细胞自噬的影响,探讨SDF?1在骨性关节炎中的作用及机制。方法分离并体外培养小鼠关节软骨细胞,分别予以0、1、10、100、1000μg/L浓度的五组重组SDF?1蛋白干预24 h。运用RT?PCR检测各组细胞的微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3, LC3)和UNC?51样激酶复合物1(uncoordinated?51 like kinase 1, ULK1)mRNA表达情况,运用Western Blot方法检测LC3?Ⅱ、LC3?Ⅰ、ULK1及泛素连接蛋白62(ubiquitin?binding protein p62, p62)蛋白表达水平,通过透射电镜观察自噬溶酶体。结果 RT?PCR结果显示10、100、1000μg/L浓度条件下LC3、ULK1的mRNA水平明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果显示1、10、100、1000μg/L的各组细胞的LC3?Ⅱ/LC3?Ⅰ比值、ULK?1表达水平较对照组升高,p62蛋白表达水平较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。透射电镜结果显示经SDF?1干预后,自噬溶酶体较对照组增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SDF?1可诱导小鼠关节软骨细胞自噬的发生,SDF?1可能通过调节软骨细胞自噬水平参与了骨性关节炎的进展。

作者:张津铭;吕正涛;卢伟伟;李兴艳;董永辉;祁军;黄晖;郭风劲;陈安民

来源:骨科 2016 年 7卷 4期

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张津铭;吕正涛;卢伟伟;李兴艳;董永辉;祁军;黄晖;郭风劲;陈安民
来源:
骨科 2016 年 7卷 4期
标签:
基质细胞衍生因子-1 软骨细胞 自噬 骨关节炎 Stromal cell-derived factor-1 Chondrocyte Autophagy Osteoarthritis
目的:通过研究基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor?1, SDF?1)对小鼠关节软骨细胞自噬的影响,探讨SDF?1在骨性关节炎中的作用及机制。方法分离并体外培养小鼠关节软骨细胞,分别予以0、1、10、100、1000μg/L浓度的五组重组SDF?1蛋白干预24 h。运用RT?PCR检测各组细胞的微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3, LC3)和UNC?51样激酶复合物1(uncoordinated?51 like kinase 1, ULK1)mRNA表达情况,运用Western Blot方法检测LC3?Ⅱ、LC3?Ⅰ、ULK1及泛素连接蛋白62(ubiquitin?binding protein p62, p62)蛋白表达水平,通过透射电镜观察自噬溶酶体。结果 RT?PCR结果显示10、100、1000μg/L浓度条件下LC3、ULK1的mRNA水平明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果显示1、10、100、1000μg/L的各组细胞的LC3?Ⅱ/LC3?Ⅰ比值、ULK?1表达水平较对照组升高,p62蛋白表达水平较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。透射电镜结果显示经SDF?1干预后,自噬溶酶体较对照组增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SDF?1可诱导小鼠关节软骨细胞自噬的发生,SDF?1可能通过调节软骨细胞自噬水平参与了骨性关节炎的进展。