目的 探讨基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1 α,SDF-1α)对体外血清剥夺诱导的心脏干细胞(cadiac stem cells,CSC)凋亡的抑制作用,并探讨其机制.方法 体外分离培养小鼠CSC.免疫磁珠分选c-kit+ CSC,纯化后分为5组,即正常对照组、饥饿组、饥饿+SDF-1α组(又根据SDF-1α不同浓度分为10、50、100、200 ng/ml干预亚组)、饥饿+SDF-1α+ AMD3100组和饥饿+ SDF-1α+LY294002组.原位末端转移酶标记法(TUNEL法)和异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)流式双标法检测各组CSC凋亡情况,CCK-8法检测CSC活力,Westem blot法检测抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)以及磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶(p-Akt)的表达水平,并使用比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性.结果 CSC经磁珠分选后c-kit阳性率可达85%以上.饥饿组细胞凋亡率明显高于正常对照组[(27.03±0.80)%比(1.51±0.54)%,P<0.01].饥饿+SDF-1α组各亚组细胞凋亡率均明显低于饥饿组(P均<0.01),CSC凋亡率在饥饿+SDF-1α 10、50、100 ng/ml干预组渐次降低,以100 ng/ml干预组为最低[(10.67±1.06)%,与饥饿组比较P<0.01].饥饿+SDF-1α 100 ng/ml组p-Akt和Bcl-2的蛋白表达均明显高于饥饿组(P均<0.01),而caspase-3活性则均明显低于
作者:黄荣;马根山;潘啸东;陈中璞;盛祖龙;胡圣大;姚玉宇;陈忠
来源:中华心血管病杂志 2013 年 41卷 10期