目的 探讨Western Blot检测P-糖蛋白表达的实验优化条件.方法 随机选择6只雄性SD大鼠,给予荭草花提取物0. 4g/(kg·d)灌胃,连续灌胃6d.采用钙盐沉淀法提取6只大鼠肝微粒体,利用BCA法进行蛋白定量后,制备蛋白上样样品.比较不同样品处理方法 、转膜方法 的检测效果.结果 与高温变性相比,样品经室温变性上样可检测到目的 条带.湿法电转法较半干法电转法转膜效果好,且湿转条件选择120V,2h较为好.结论 样品室温变性处理、120V,2h的湿转转膜条件,是检测P-糖蛋白较优的Western Blot方法.并且在经荭草花提取物给药后的6只SD大鼠肝组织内P-糖蛋白的表达呈现一定的差异.
作者:吴琼;杨友辉;杨健;薛维娜;李勇军;何彬;兰燕宇;刘亭
来源:贵州医药 2018 年 42卷 1期