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目的:评估三氯甲烷抽提冻融细胞沉淀内腺病毒颗粒的效果,建立一种提高氯化铯垫层超速离心纯化腺病毒产量的方法。方法:收集感染腺病毒的HEK293细胞,反复冻融3次,离心后分别收获细胞冻融后上清及细胞残渣,使用三氯甲烷抽提细胞残渣内病毒颗粒,通过氯化铯密度梯度超速离心法纯化腺病毒。通过透射电子显微镜技术评价三氯甲烷抽提腺病毒的效果,通过分光光度计法及测定病毒感染滴度分析获得纯化腺病毒产量及活性。结果:三氯甲烷可促进冻融细胞残渣内病毒颗粒释放,增加约34

作者:冯红丽;岳成;庞浩;宋敬东

来源:国际病毒学杂志 2021 年 28卷 5期

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作者:
冯红丽;岳成;庞浩;宋敬东
来源:
国际病毒学杂志 2021 年 28卷 5期
标签:
腺病毒 三氯甲烷 氯化铯 超速离心 纯化 Adenovirus Chloroform Cesium chloride Ultracentrifugation Purification
目的:评估三氯甲烷抽提冻融细胞沉淀内腺病毒颗粒的效果,建立一种提高氯化铯垫层超速离心纯化腺病毒产量的方法。方法:收集感染腺病毒的HEK293细胞,反复冻融3次,离心后分别收获细胞冻融后上清及细胞残渣,使用三氯甲烷抽提细胞残渣内病毒颗粒,通过氯化铯密度梯度超速离心法纯化腺病毒。通过透射电子显微镜技术评价三氯甲烷抽提腺病毒的效果,通过分光光度计法及测定病毒感染滴度分析获得纯化腺病毒产量及活性。结果:三氯甲烷可促进冻融细胞残渣内病毒颗粒释放,增加约34