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目的 克隆、表达人腺病毒六邻体蛋白基底区片段,为后续研究六邻体蛋白的抗原性及蛋白结构,进而研发腺病毒的基因工程疫苗及诊断试剂奠定基础.方法 以3型人腺病毒核酸为模板,用PCR法扩增六邻体基底区片段,将该片段定向克隆至pQE32质粒,在大肠杆菌表达系统中表达带有组氨酸标签的重组蛋白片段,利用镍亲和层析法对重组蛋白进行纯化.结果 构建出重组表达质粒,通过测序验证了克隆结果的正确性;在大肠杆菌表达体系中获得了高效表达.结论 成功表达并获得了纯化的人3型腺病毒六邻体基底区重组蛋白片段.

作者:崔奇;董妥;王迎晨;李宇;齐彬彬;Vladimir I.Zlobin;Yuri P.Dzhioev;Oleg N.Reva;曲章义

来源:哈尔滨医科大学学报 2017 年 51卷 3期

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作者:
崔奇;董妥;王迎晨;李宇;齐彬彬;Vladimir I.Zlobin;Yuri P.Dzhioev;Oleg N.Reva;曲章义
来源:
哈尔滨医科大学学报 2017 年 51卷 3期
标签:
腺病毒 六邻体 蛋白表达 蛋白纯化 adenovirus hexon protein expression protein purification
目的 克隆、表达人腺病毒六邻体蛋白基底区片段,为后续研究六邻体蛋白的抗原性及蛋白结构,进而研发腺病毒的基因工程疫苗及诊断试剂奠定基础.方法 以3型人腺病毒核酸为模板,用PCR法扩增六邻体基底区片段,将该片段定向克隆至pQE32质粒,在大肠杆菌表达系统中表达带有组氨酸标签的重组蛋白片段,利用镍亲和层析法对重组蛋白进行纯化.结果 构建出重组表达质粒,通过测序验证了克隆结果的正确性;在大肠杆菌表达体系中获得了高效表达.结论 成功表达并获得了纯化的人3型腺病毒六邻体基底区重组蛋白片段.